Cấy bán định lượng là gì trong vi sinh
|
- Chủng chuẩn Thermo Scientific™ Quanti-Cult Plus™ cung cấp số lượng vi sinh vật cụ thể có độ tái lặp, từ nguồn xác thực và chất lượng cao của ATCC, chủng chuẩn được hoàn nguyên một cách an toàn trong các ống. Mỗi ống được phân phối 0.1 mL cho tối đa 10 lần sử dụng, với mỗi ống chứa <100 CFU (đơn vị khuẩn lạc). Show - Gel bảo quản vi sinh trên nắp của các lọ giúp quá trình hoàn nguyên an toàn, giảm thiểu được thao tác chuyển sinh vật bằng kẹp gắp vô trùng. - Hiệu suất: Thay thế các thao tác tốn thời gian như pha loãng nối tiếp hay duy trì các chủng gốc với chủng chuẩn Quanti-Cult Plus, giúp giảm thời gian thực hiện quy trình từ 2-3 ngày xuống chỉ còn 15 phút, tiết kiệm thời gian cũng như ngân sách. - An toàn: Giảm thiểu nguy cơ tạp nhiễm và nhiễm khuẩn với hệ thống sẵn sàng hoàn nguyên được thiết kế 2 ống chứa chủng và dung dịch riêng biệt mà không cần đến thao tác xử lý vi sinh vật. - Tin cậy: Đạt tiêu chuản Truy xuất được hoàn toàn nguồn gốc chủng chuẩn với ATCC® License Derivative strains. - Đặc tính: Duy trì khả năng sống sót và phục hồi của chủng bằng cách bảo quản chủng vi sinh trong hợp chất gel đặc trưng cung cấp số lượng khuẩn lạc đếm được nhất quán đến tám giờ sau khi hoàn nguyên và bảo quản ở 2–8°C. - Lợi ích: Nhà cung cấp đồng thời cả môi trường nuôi cấy và chủng chuẩn vi sinh vật. Phân phối rộng rãi toàn cầu với dịch vụ khách hàng sẵn sàng hỗ trợ và đội ngũ hỗ trợ kỹ thuật chuyên nghiệp. - Có sẵn hơn 25 chủng chuẩn Quanti-Cult Plus, bao gồm các set cho test Growth Promotion và Water Bug hỗ trợ tiện lợi cho các kiểm nghiệm trong ngành dược, thực phẩm và nước. Trước khi tìm hiểu về các phương pháp định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm, chúng ta tìm hiểu khái niệm cơ bản về vi khuẩn hiếu khí là gì? Vi khuẩn hiếu khí là vi khuẩn tăng trưởng và hình thành khuẩn lạc trong điều kiện có sự hiện diện của oxy phân tử. Tổng số vi khuẩn hiếu khí hiện diện trong mẫu phản ánh vệ sinh chế biến, độ tươi mới hay nguy cơ gây hư hỏng của thực phẩm. Đây cũng là một trong những chỉ tiêu trong kiểm tra vệ sinh thực phẩm trong quá trình sản xuất, vận chuyển và bảo quản. Chỉ tiêu này được xác định bằng phương pháp đếm khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch dinh dưỡng; thể diện dưới dạng số đơn vị hình thành khuẩn lạc (colony forming unit, CFU) trong một đơn vị khối lượng hay thể tích thực phẩm. 2. Phương pháp định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí bằng việc nuôi cấy trên bề mặt thạchTổng số vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm có thể được xác định bằng phương pháp nuôi cấy trên bề mặt thạch. Hoặc phương pháp hộp đổ thông qua số lượng khuẩn lạc đếm được trên đĩa petrifilm. Các phương pháp này cho phép xác định lượng vi sinh vật có khả năng sinh trưởng trong môi trường mẫu ban đầu. Ngoài ra, hiện nay còn có các vật tư, dụng cụ hỗ trợ kiểm tra tổng số vi khuẩn hiếu khí nhanh hơn như đĩa petrifilm, dipslide,… Các bước thực hiện:Chuẩn bị môi trường nuôi cấy – môi trường nuôi cấy tổng vi khuẩn hiếu khí: Plate Count Agar (PCA), pH = 7 Môi trường được nấu sôi cho tan agar, chia vào bình tam giác và hấp tiệt trùng ở 1210C/ 20 phút, để nguội sau đó đổ môi trường vào đĩa petri. Ngày nay, ta có thể mua môi trường đông khô thương phẩm của các hãng sản xuất như Merck – Đức, Oxoid – Anh Quốc, Difco – Mỹ,…Để hạn chế quá trình chuẩn bị môi trường mất nhiều thời gian và hít nhiều hóa chất. Tin Cậy cũng cung cấp tất cả các môi trường nuôi cấy vi sinh. Đồng nhất và pha loãng mẫu
Đổ đĩa và ủ mẫu
Đếm khuẩn lạcSau thời gian ủ, thực hiện đếm khuẩn lạc, có thể đếm bằng mắt thường hoặc máy đếm khuẩn lạc Tính số lượng khuẩn lạc theo công thứcTrong đó: N là số tế bào vi khuẩn trong 1g hay 1ml mẫu (CFU: colony forming units) C: Tổng số khuẩn lạc đếm được trên các hộp petri đã chọn (khoảng từ 25 – 250 khuẩn lạc/ đĩa) Ni: số hộp petri cấy tại độ pha loãng thứ nhất di: hệ số pha loãng tương ứng v: thể tích dịch mẫu (ml) cấy vào trong mỗi đĩa 3. Một số phương pháp định lượng vi khuẩn hiếu khí ưu việt hiện nayNgày nay, để tiết kiệm thời gian và đẩy nhanh mẫu vào quá trình sản xuất; người ta sử dụng phương pháp petrifilm và dùng dipslide chỉ với 3 bước thực hiện: chuẩn bị mẫu, ủ mẫu và đọc kết quả. Phương pháp dùng đĩa petrifilm:Đĩa petrifilm là đĩa cấy chứa môi trường dinh dưỡng khô. Ngoài ra còn có chất chỉ thị màu đặc trưng và chất tạo đông tan được trong nước lạnh. Để tăng khả năng quan sát sự phát triển của khuẩn lạc. Vùng sinh trưởng được khoanh tròn trên mỗi đĩa chứa khoảng 20 ô vuông. Mỗi ô có diện tích khoảng 1cm2 trên màng nền. Người sử dụng có thể cấy trực tiếp 1ml mẫu vào đĩa mà không cần trải qua công đoạn chuẩn bị môi trường và đổ đĩa. Do đó, giảm bớt được sai số trong quá trình thực hiện. Đĩa được sản xuất theo quy trình được chứng nhận tiêu chuẩn ISO 9000 và quy trình quản lý chất lượng khắt khe của Official Methods of Analysis, AOAC. Ngoài ra, đĩa petrifilm còn có kẻ các ô vuông trên đĩa nhằm hỗ trợ việc đếm khuẩn lạc nhanh, rõ ràng, đồng nhất. Đặc biệt hơn, đĩa petrifilm chỉ cho các vi khuẩn hiếu khí mọc trên đĩa như vi khuẩn Staphylococcus, Bacillus subtilis, Escherichia coli,… Việc sử dụng đĩa này đem lại nhiều lợi ích cho người sử dụng: nhỏ gọn, cải tiến, dễ sử dụng, tiết kiệm thời gian và nhân công. Hạn chế việc hít phải hóa chất độc hại, đẩy nhanh việc đưa nguyên liệu vào sản xuất. Phương pháp sử dụng dipslide:Hiện nay, việc sử dụng dipslide kiểm tra tổng vi khuẩn hiếu trong các dung dịch nhũ tương như dầu, nước, tương,…cũng được áp dụng khá phổ biến. Cách sử dụng và các bước tiến hành đã được Tin Cậy giới thiệu trong bài đọc “Test nhanh vi khuẩn bằng Dipslide” Mọi thắc mắc về” Phương pháp định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm”, xin vui lòng liên hệ: |
